凱氏定氮法的優缺點及注意事項 凱氏定氮法的優缺點及注意事項有哪些

更新于:2021-11-07 21:04:49

  優點:可用于所有食品的蛋白質分析中;操作相對比較簡單;實驗費用較低;結果準確,是一種測定蛋白質的經典方法;用改進方法可測定樣品中微量的蛋白質。缺點:最終測定的是總有機氮,而不只是蛋白質氮;實驗時間太長;精度差,精度低于雙縮脲法;所用試劑有腐蝕性。

  注意事項

  1、樣品應是均勻的,如是固體樣品應事先研細,液體樣要混合均勻。

  2、蒸餾時,蒸汽發生要充足均勻,加入樣品后,應用少量蒸餾水沖洗,以免影響結果偏低,加氧化鎂要快,防止氨損失。冷凝管口應滲入吸收液中,防止氨損失。

  3.蒸餾完畢后,應先將接受瓶液面離開冷凝管下端,并放在其下方,冷凝液清洗管口內壁,再蒸1min后關掉熱源,否則會造成吸收液倒吸。

  凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,再以標準鹽酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。

  由于蛋白質含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質含量,故此法是經典的蛋白質定量方法。

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